DLS數(shù)據(jù)解析

Nicomp® 系統(tǒng)

概述

Entegris Nicomp®動態(tài)光散射（DLS）系統(tǒng)是一種易于使用的粒度和zeta電位分析儀。本技術文檔顯示了Nicomp的典型結果，并對聲場的數(shù)據(jù)進行解析說明。

簡介：動態(tài)光散射

DLS 技術是測量 1 nm 至約 10 μm 懸浮液粒徑的理想方法（取決于顆粒密度）。Nicomp系統(tǒng)的簡化光學圖如圖1所示。

粒子布朗運動產(chǎn)生的光散射導致探測器上的光字計數(shù)波動。波動的時間特征用于創(chuàng)建相關函數(shù)，由此確定平移擴散系數(shù)D。然后使用斯托克斯-愛因斯坦方程計算粒徑R：

D = kT / 6πηR

說明:

k = 玻爾茲曼常數(shù)

η = 溶劑的粘度

T = 溫度（K）

R = 粒子半徑

圖 1. DLS光學器件

結果解析

窄分布的聚苯乙烯乳膠標準品（PSL）的典型結果如圖2所示。

圖 2. Nicomp DLS 結果

這是一個強度加權高斯分布，因此完整的結果可以用兩個數(shù)字定義；平均值和均方差。但是DLS¹的ISO標準建議應使用平均值和多分散指數(shù)PI報告結果

ISO 22412-2008中使用的命名法在技術上是準確的，但在現(xiàn)實中很少使用。例如，用于強度加權平均直徑的術語是 。在Nicomp軟件中，這個值是平均直徑。在其他供應商的軟件中，這有時被稱為Z平均值或Zave。因此，要按照 ISO 22412-2008 中的指導報告 Nicomp 結果，要展示的兩個值是平均直徑和方差 （PI）。

下面描述了圖 2 中從左到右、從上到下顯示的所有報告值。

平均直徑 = 強度分布的平均直徑（光強徑），還有 和 Zave。

Coeff. Of Var’n. = 強度分布的變化系數(shù)

= 標準偏差/平均值

Stnd. Dev. = 強度分布的標準偏差，占總分布的 68.2%

± 1V 以內(nèi)

Norm. Stnd. Dev. = Stnd. Dev./Mean

方差 （PI） = 多分散系數(shù)，定義如下

Where: 3Qint,i : intensity-weighted amount of particles with size xi the size distributions may be obtained as a discrete set of diameters, xi, and corresponding intensity-weighted amounts {3Qint, i, xi, i = 1...N}

△Qint,i:粒徑為xi的顆粒的強度加權量。粒徑分布可以得到為直徑，xi和相應的強度加權量的離散集合{△Qint, i, xi, i = 1…N}

“Solid Particle” = Nicomp 軟件在從強度分布轉(zhuǎn)換為基于體積或數(shù)量的分布時，使用兩種折射率模型。“Solid Particle”模型假設顆粒的折射率RI與分散液體的RI之間存在很大差異。“Vesicle”模型假設RI顆粒/RI液體的比例更接近，并針對脂質(zhì)體進行了優(yōu)化。

注意：這些模型不影響強度結果，只影響體積和數(shù)量結果。

Run Time = 測量持續(xù)時間的長度

Chi Squared=擬合優(yōu)度計算

注： 此值還指示應使用高斯還是多模態(tài) Nicomp 結果。如果卡方值低于 2-3，則建議使用高斯結果。對于大于 3 卡方值（Chi），請考慮使用 Nicomp 結果。

Auto B. Adj. = 自動基線調(diào)整。當存在一些大顆粒或原始數(shù)據(jù)嘈雜時，相關函數(shù)的基線可能會不穩(wěn)定。較高的Auto B. Adj 調(diào)整值表示數(shù)據(jù)存在噪聲，可能需要更好的樣品制備。

Ch 1. Data X1000 = 相關函數(shù)中通道 # 1 的內(nèi)容。值越高，表示函數(shù)中的統(tǒng)計準確性越高。

Z-Average Diff Coeff = 斯托克斯-愛因斯坦方程中使用的擴散系數(shù)D，用于將擴散系數(shù)轉(zhuǎn)換為粒徑。

分布類型

圖 2 所示的結果是高斯結果;由平均值和標準差（或 PI）定義。高斯分布的特征是，總數(shù)的 68% 與平均值相差在 1 個標準差范圍內(nèi)，如圖 3 所示。

圖3. 高斯分布

對于具有多個峰的樣品，使用特殊的的Nicomp計算來解析多峰。較大的卡方值表示簡單的高斯結果不能很好地表示原始數(shù)據(jù)。特殊的Nicomp分布分析使用的一般數(shù)學過程稱為拉普拉斯變換反演（“ILT”）。這種相當復雜的技術也被用于分析其他科學領域的各種問題，與光散射無關。具體的數(shù)學過程是高斯（累積量）分析中使用的最小二乘計算的更復雜的版本;它被稱為非負最小二乘（“NNLS”）分析。

如圖4所示的結果具有較高的Chi平方值，這意味著高斯結果與原始數(shù)據(jù)不是更好的擬合，應考慮Nicomp結果。Nicomp結果如圖5所示。

圖4.高Chi平方結果，高斯結果

圖5.Nicomp 結果

DLS 測量的主要結果是強度加權分布。結果可以轉(zhuǎn)換為數(shù)量或體積分布，以便與其他技術進行比較。例如，由于顯微鏡產(chǎn)生數(shù)量加權分布，因此數(shù)量分布將顯示更接近SEM結果的結果。強度分布將類似于窄對稱分布的體積或數(shù)量分布。對于更廣泛的分布，結果將按照從大到小的一般順序出現(xiàn)相當大的差異：強度>體積>數(shù)量。樣品的強度、體積和數(shù)量結果的比較如圖6-8所示。

圖6. 強度分布結果（光強徑）

圖7. 體積分布結果（體積徑）

圖8. 數(shù)量分布結果（數(shù)量徑）

注意：第六個百分比數(shù)據(jù)（在本例中為 80%）可由操作員在“控制”菜單中更改。

圖 9.累積結果

21 CFR 第 11 部分軟件

Nicomp Net 21 CFR Part 11軟件的結果打印輸出如圖10所示。

圖 10.符合 21CFR11 標準的軟件的結果

此圖中顯示的結果與本文檔前面顯示的結果基本相同，但存在以下差異：

在圖11所示的“分析結果”中，“直徑”結果實際上是基于強度、體積和數(shù)量分布的平均結果。

分析結果 – 高斯分布

圖 11.21CFR11軟件的平均直徑結果

在本例中，強度平均直徑（或Z average或）為94.02 nm。

ZETA電位

Nicomp系統(tǒng)還可用于測量樣品的zeta電位。zeta電位是距離顆粒表面一小段距離的電荷，如圖12所示。

圖12 Zeta電位

通過向懸浮液施加電場并測量粒子運動的速度和方向來分析Zeta電位。zeta電位測量的主要結果是電泳遷移率μ然后使用以下公式計算zeta電位：

Nicomp可以通過檢測頻率或相移來測量粒子運動。優(yōu)先方法是使用相位分析光散射（PALS）技術測量相移。

Nicomp系統(tǒng)的典型zeta電位結果如圖13所示。

圖 12. Zeta 電位結果

此測量值要關注的結果值是平均 Zeta 電位，在本例中為八次測量后的累積值。強烈建議進行多次 zeta 電位測量并使用平均值。

有時，應該要進行多次運行，每次運行進行多次分析 - 然后取多次運行的平均值。在進行最終平均計算時，不包括罕見和異常的 zeta 電位值。

對于此示例，用戶選擇施加 4 V/cm 的電場強度。顯示的平均相位移為27.9 rad/s，平均μ為-2.53 m.U.，zeta電位為-34.00 mV。

引用

1 ISO 22412 -2008 Particle size analysis — Dynamic light scattering (DLS)

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